Hypoxia-inducible factor HIF-1α modulates drugs resistance in colon cancer cells / Factor inducible por hipoxia HIF-1α modula la resistencia a drogas en células de cáncer de colon

Abstract Introduction: Drug resistance mechanisms may be associated with decreased cell death and its induction may depend on the response to oxidative stress caused by hypoxia. The correlation between hypoxia-inducible factor HIF-1α, the number of reactive oxygen species and their effect on cell survival has not yet been evaluated. Objective: The purpose of this study was to evaluate the effect of HIF-1α activity and reactive oxygen species (ROS) accumulation in apoptosis of colon cancer cells. Materials and methods: HT29 colon cancer cells were treated with Cobalt(II) chloride (CoCl2) or doxorubicin and the activity of HIF-1α was determined by ELISA assay. ROS were determined using fluorescence probe carboxy-H2DFFDA. Apoptosis was assessed by caspase-3 activation analysis, and PUMA and BAX mRNA levels by qRT-PCR. The reduction of the antiapoptotic effect due to hypoxia was attenuated by use of the endonuclease APE-1 (E3330) inhibitor. The endonuclease E3330 APE-1 inhibitor allowed evaluating the effect of ROS generated by doxorubicin and CoCl2 on apoptosis. Results: Chemical hypoxia in combination with doxorubicin is an oxidative stressor in HT29 cells and induces a reduction in the apoptotic process in a time-dependent manner. Conclusion: Resistance to hypoxia and doxorubicin-mediated cell death could be controlled by a mechanism related to the activity of HIF-1α and the amount of reactive oxygen species generated.

Resumen Introducción. Los mecanismos de resistencia a drogas podrían asociarse con disminución en la muerte celular y su inducción podría depender de la respuesta al estrés oxidativo que origina la hipoxia. La correlación entre factor inducible por hipoxia HIF-1α, cantidad de especies reactivas de oxígeno y su efecto sobre la supervivencia celular aún no ha sido evaluada. Objetivo. Evaluar el efecto de la inducción de la actividad de HIF-1α y la cantidad de especies reactivas de oxígeno sobre la apoptosis en células de cáncer de colon. Materiales y métodos. Células de cáncer de colon HT29 fueron tratadas con cloruro de cobalto (CoCl2) o doxorrubicina; la actividad de HIF-1α se evaluó por ELISA. Las especies reactivas de oxígeno fueron determinadas con sonda fluorescente carboxi-H2DFFDA. La apoptosis fue evaluada por la actividad de caspasa-3 y los niveles de mRNA de los genes proapoptóticos PUMA y BAX por qRT-PCR. El inhibidor de la endonucleasa APE-1 E3330 permitió evaluar el efecto de las especies reactivas de oxígeno generadas por doxorubicina y CoCl2 sobre la apoptosis. Resultados. La hipoxia química combinada + doxorubicina es estresor oxidativo en células HT29 e induce una reducción en el proceso apoptótico de manera tiempo dependiente. Conclusión. La resistencia a la muerte celular mediada por hipoxia y doxorubicina podría estar controlada por un mecanismo relacionado con la actividad de HIF-1α y la cantidad de especies reactivas de oxígeno generadas.

Influencia de la presión de oxígeno ambiental sobre la regeneración ósea guiada / Influence of ambient oxygen pressure on guided bone regeration

RESUMEN: Objetivo: Evaluar la influencia de la variación en la presión de oxígeno ambiental sobre la regeneración ósea guiada en cobayos. Material y método: Treinta y dos cobayos machos de 750±50g de peso fueron asignados en 2 grupos de 16 integrantes cada uno (grupo A: trabajado a 150msnm en la ciudad de Lima y a presión de oxígeno de 157mmHg; grupo B: trabajado a 3.230msnm en la ciudad de Jauja y a presión de oxígeno de 107mmHg). En ambos grupos se indujeron defectos óseos mandibulares de 5×6mm a través de un acceso quirúrgico extraoral; a 8 cobayos de cada grupo se les recubrió el defecto con una membrana de colágeno reabsorbible de origen porcino, mas al resto de animales no. Se evaluó el conteo celular de osteoblastos y osteocitos a los 15 y 30 días postoperatoriamente. Resultados: A los 15 y a los 30 días, en los grupos trabajados en altura y en los que se aplicó la membrana, la cantidad de osteoblastos fue 71±12,1 cél/camp y 83±7,2 cél/camp respectivamente, y la de osteocitos fue 34,5±6,6 cél/camp y 25±7,6 respectivamente; siendo estos grupos, en todas las comparaciones, los que tuvieron mayor cantidad de células óseas, aunque sin ser diferencias estadísticamente significativas (p>0,05). Conclusión: Se encontró tendencia a formar mayor cantidad de células óseas en las muestras tratadas con regeneración ósea y expuestas a la altitud comparados con el nivel del mar.

ABSTRACT: Objective: To evaluate the influence of the variation in ambient oxygen pressure on guided bone regeneration in guinea pigs. Material and method: A total of 32 male guinea pigs weighing 750±50g were assigned into two groups of 16 (group A: studied at 150 metres above sea level in the city of Lima and oxygen pressure of 157mmHg; group B: was at 3230 meters above sea level in the city of Jauja and an oxygen pressure of 107mmHg). Bone defects of 5×6mm were induced in the jaw in both groups through extra-oral surgical access. The defect in 8 guinea pigs of each group were covered with a porcine resorbable collagen membrane, but not in the other animals. The osteoblast and osteocyte cell counts were evaluated at 15 and 30 days post-operatively. Results: At 15 and 30 days, in the groups studied at height and with the membrane applied, the osteoblast count was 71±12.1 cells/field, and 83±7.2 cells/field, respectively, and an osteocyte count of 34.5±6.6 cells/field, and 25±7.6 cells/field, respectively. These groups had a higher number of bone cells in all the comparisons, but there were no statistically significant differences (P>.05). Conclusion: There was a tendency to form a greater amount of bone cells was found in the samples treated with bone regeneration and exposed to altitude compared to those at sea level.

Pré-condicionamento isquêmico remoto em portadores de claudicação intermitente de membros inferiores / Remote ischemic preconditioning in patients with intermittent claudication

INTRODUÇÃO: Pré-condicionamento isquêmico remoto (PCIR) é o fenômeno pelo qual curtos períodos de isquemia sub-letal sobre um órgão ou tecido, intercalados com reperfusão do mesmo, conferem a outros órgãos ou tecidos distantes deste, um aumento na capacidade da resistir a episódios subsequentes de isquemia, a qual os mesmos possam ser expostos. Com base nesse fato, testamos a hipótese de que o pré-condicionamento isquêmico remoto em pacientes portadores de claudicação intermitente de membros inferiores poderia aumentar a capacidade de deambulação desses pacientes, extrapolando o conceito do PCIR de aumento da capacidade de preservação da integridade celular frente à isquemia, para a manutenção da função celular, tornando a célula mais apta ao trabalho em situações de privação de oxigênio, geradas pela restrição do fluxo sanguíneo, como ocorre nos pacientes com claudicação intermitente de membros inferiores, durante o exercício. OBJETIVOS: Avaliar se o PCIR aumenta a distância de início de claudicação e/ou a distância total de claudicação em pacientes com doença arterial obstrutiva periférica. MÉTODOS: Foram estudados 52 pacientes ambulatoriais que apresentavam queixa de claudicação intermitente dos membros inferiores, associada a um pulso arterial ausente ou reduzido no membro sintomático e/ou um índice tornozelo-braço <0,90. Estes pacientes foram randomizados em três grupos (A, B e C). Todos os pacientes foram submetidos a dois testes de caminhada em esteira de acordo com o protocolo de Gardner. O grupo A fez o primeiro teste de esteira sem o pré-condicionamento isquêmico remoto e, após 7 dias, foi submetido a um novo teste de esteira, agora precedido pelo pré-condicionamento isquêmico remoto. O grupo B foi submetido ao pré-condicionamento isquêmico remoto antes do primeiro teste de esteira e, após 7 dias, realizou novo teste de esteira, agora sem o pré-condicionamento isquêmico remoto. Já no Grupo C (grupo controle), ambos os testes de esteira foram...

INTRODUCTION: Remote ischemic preconditioning (RIPC) is a phenomenon in which a short period of sub-lethal ischemia in one organ protects against subsequent bouts of ischemia in another organ. Extrapolating the RIPC concept of increasing the preservation of cell integrity capability against ischemia, for the maintenance of cellular function, making the cell more able to work in oxygen deprivation generated by the restriction of blood flow, as occurs in patients with intermittent claudication of the lower limbs during exercise, we hypothesized that RIPC in patients with intermittent claudication would increase muscle tissue resistance to ischemia, thereby resulting in an increased ability to walk. OBJECTIVES: To test this hypothesis, we performed gait tests in patients with claudication with and without prior RIPC and then compared the initial claudication distance (ICD) and the total walking distance (TWD). METHODS: In a claudication clinic, 52 ambulatory patients who presented with complaints of intermittent claudication in the lower limbs associated with an absent or reduced arterial pulse in the symptomatic limb and/or an ankle-brachial index < 0.90 were recruited for this study. The patients were randomly divided into three groups (A, B and C). All of the patients underwent two tests on a treadmill according to the Gardener protocol. Group A was tested first without RIPC. Group A was subjected to RIPC prior to the second treadmill test. Group B was subjected to RIPC prior to the first treadmill test and then was subjected to a treadmill test without RIPC. In Group C (control group), both treadmill tests were performed without RIPC. The first and second tests were conducted seven days apart. Brazilian Clinical Trials: RBR-7TF6TM. RESULTS: Group A and C showed an increase in the initial claudication distance in the second test compared to the first test. Group A had a statistically significant increase, compared with C group (control group). With respect...

The effect of hypoxia and reoxygenation in the response of mesangial cells to angiotensin II in vitro / Efeito da hipóxia e reoxigenação na resposta à angiotensina II em células mesangiais in vitro

INTRODUCTION: Mesangial cells (MC) may be involved in the glomerular alterations induced by ischemia/reperfusion injury. OBJECTIVE: To evaluate the response of immortalized MC (IMC) to 30 minutes of hypoxia followed by reoxygenation periods of 30 minutes (H/R30) or 24 hours (H/R24). METHODS: The intracellular calcium concentration ([Ca+2]i) was measured before (baseline) and after adding angiotensin II (AII, 10-5 M) in the presence and absence of glybenclamide (K ATP channel blocker). We estimated the level of intracellular ATP, nitric oxide (NO) and PGE2. RESULTS: ATP concentration decreased after hypoxia and increased after reoxygenation. Hypoxia and H/R induced increases in basal [Ca+2]i. AII induced increases in [Ca+2]i in normoxia (97 ± 9%), hypoxia (72 ± 10%) or HR30 (85 ± 17%) groups, but there was a decrease in the response to AII in group H/R24 since the elevation in [Ca+2]i was significantly lower than in control (61 ± 10%, p < 0.05). Glybenclamide did not modify this response. It was observed a significant increase in NO generation after 24 hours of reoxygenation, but no difference in PGE2 production was observed. Data suggest that H/R injury is characterized by increased basal [Ca+2]i and by an impairment in the response of cells to AII. Results suggest that the relative insensibility to AII may be at least in part mediated by NO but not by prostaglandins or vasodilator K ATP channels. CONCLUSION: H/R caused dysfunction in IMC characterized by increases in basal [Ca+2]i during hypoxia and reduction in the functional response to AII during reoxygenation.

INTRODUÇÃO: Células mesangiais (CM) podem estar envolvidas na lesão glomerular induzida por hipoxia/reperfusão (H/R). OBJETIVO: Avaliar a resposta de CM imortalizadas (CMI) à hipoxia por 30 minutos seguida de reoxigenação por 30 minutos (H/R30) ou 24 horas (H/R24). MÉTODOS: Concentração de cálcio intracelular ([Ca+2]i) foi avaliada antes (basal) e após a adição de angiotensina II (AII, 10-5 M), na presença e na ausência de glibenclamida (bloqueador de canais K ATP). Foram estimados o nível de ATP intracelular, de óxido nítrico (NO) e de PGE2. RESULTADOS: Nível de ATP diminuiu após hipóxia e aumentou após a reoxigenação. H/R induziu aumento na [Ca+2]i basal. A AII elevou a [Ca+2]i nas condições de normoxia (97 ± 9%), hipoxia (72 ± 10%) ou HR30 (85 ± 17%), porém no grupo H/R24, houve diminuição significativa na resposta à AII, uma vez que a elevação da [Ca+2]i foi mais baixa do que no controle (61 ± 10%, p < 0,05). Glibenclamida não alterou esta resposta. Houve um aumento significativo na geração de NO após 24 horas de reoxigenação, mas não foi observada nenhuma diferença na produção de PGE2. Os dados indicam que a injuria celular causada pela hipoxia/reoxigenação é caracterizada pelo aumento na [Ca+2]i basal e por uma diminuição na reatividade celular à AII. Resultados sugerem que a insensibilidade ao agonista constritor pode ser pelo menos em parte, mediada pelo NO, mas não pelas prostaglandinas ou por canais K ATP. CONCLUSÃO: H/R resultou em disfunção das CMI, caracterizada pelo aumento na [Ca+2]i basal durante a hipóxia e redução da resposta funcional a AII durante a reoxigenação.

Immunohistochemical profile of HIF-1α, VEGF-A, VEGFR2 and MMP9 proteins in tegumentary leishmaniasis / Estudo da expressão imunohistoquímica das proteínas HIF-1α, VEGF-A, VEGFR2 e MMP9 em leishmaniose tegumentar americana

BACKGROUND: Leishmaniasis is one of the most important infectious diseases worldwide. Our study can provide more knowledge about angiogenic and hypoxic events in leishmaniasis. We attempted to verify whether the HIF-1 α protein expression may be associated to VEGF-A, VEGFR2 and MMP9 in leishmanial lesions. OBJECTIVES: Besides understanding the pathway, we performed the correlation of VEGF-A, VEGFR2 and MMP9 proteins. METHODS: In this study, we gathered 54 paraffin blocks taken from skin lesions in patients from northern Minas Gerais, Brazil, with confirmed diagnosis of tegumentary leishmaniasis. Immunohistochemistry was used to evaluate the expression of the proteins. The expression of HIF-1α was categorized into two groups according to the median: HIF-1 α lower and HIF-1 α higher. RESULTS: We observed increase of VEGFR2 and MMP9 protein expressions in HIF-1 α higher group of epithelial cells. Spearman analyses in epithelial cells showed correlation between VEGF-A and MMP9, VEGFR2 and MMP9 protein expression. CONCLUSIONS: HIF-1 α higher group showed increase of VEGFR2 and MMP9 proteins. In epithelial cells, VEGF-A was correlated to MMP9 protein. Furthermore, considering leukocyte cells, VEGFR2 was negatively correlated to MMP9 protein levels. This pathway possibly prepares the cells for a higher activity in a hypoxic or an angiogenic microenvironment. Other in vitro and in vivo studies may clarify the activation mechanism and the response from the proteins HIF-1 α, VEGFR2 and MMP-9 in tegumentary leishmaniasis.

FUNDAMENTOS: A leishmaniose é uma das mais importantes doenças infecciosas em todo o mundo. Em leishmaniose, tem sido sugerido que muitas características da lesão está associado a eventos de hipóxia, podendo este ter um papel fundamental na evolução da doença. OBJETIVO: O presente estudo pode fornecer dados acerca do fenômeno hipóxia e da angiogênese em leishmaniose tegumentar americana. Buscou-se verificar se a expressão da proteína HIF-1 α associa-se à expressão das proteínas VEGF-A, VEGFR2 e MMP9 em lesões de Leishmania sp. MÉTODOS: Neste estudo retrospectivo, foram utilizados 54 blocos de parafina de lesões de leishmaniose tegumentar americana de pacientes do norte de Minas Gerais, Brasil, com diagnóstico confirmado de leishmaniose tegumentar americana. A técnica de imunohistoquimica foi utilizada para avaliação da expressão das proteínas. A expressão da HIF-1α foi categorizada em dois grupos de acordo com a mediana: HIF-1 α abaixo e HIF-1 α acima da mediana. RESULTADOS: Observamos aumento das expressões das proteínas VEGFR2 e MMP9 no grupo HIF-1 α acima da mediana. A análise de Spearman demonstrou correlação entre as proteínas VEGF-A e MMP9, VEGFR2 e MMP9. CONCLUSÃO: Os dados aqui apresentados indicam uma alta expressão da proteína HIF-1 α em LTA. O grupo HIF-1α acima da mediana apresentou maior expressão das proteínas VEGFR2 e MMP9. Foi demonstrada correlação entre as proteínas VEGF-A e MMP9, VEGFR2 e MMP9. Outros estudos in vitro e in vivo devem ser realizados a fim de esclarecer o mecanismo de ativação e resposta das proteínas HIF-1 α, VEGFR2 e MMP-9 em leishmaniose tegumentar americana.

Transfusão consciente de hemoderivados. Revisão sistemática dos fatores indicativos do gatilho para a infusão dos componentes sanguíneos / Consciously transfusion of blood products. Systematic review of indicative factors for blood components infusion's trigger / Transfusión consciente de hemoderivados. Revisión sistemática del los factores indicativos del gatillo para la infusión de los componentes sanguíneos

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Com o avanço da tecnologia cirúrgica e anestésica, expandem-se as indicações de intervenção, assim como, em muitos casos, a necessidade de transfusão de hemoderivados. Com grande valor científico, o tema a ser exposto é alvo de infindáveis discussões que fornecem diferentes diretrizes nos diversos aspectos clínicos e laboratoriais. O objetivo dessa revisão é determinar os sinais clínicos, laboratoriais e de monitoração que devem guiar o início da hemotransfusão, evitando-se qualquer risco e o uso desnecessário de recursos, além da demora no início da terapia, determinando hipóxia tecidual e suas consequências. CONTEÚDO: Foram utilizados artigos científicos de ensaios clínicos e revisões sobre vários assuntos abordados no presente conteúdo. Estes foram divididos em orientações segundo aspectos clínicos e laboratoriais. Após a aplicação da estratégia de busca acima relatada, foram identificados 2.608 artigos científicos do gênero, porém somente 17 referências originais foram selecionadas pelos critérios de inclusão. CONCLUSÕES: A literatura é incerta sobre os critérios clínicos que devem guiar o ponto ideal de início da terapia transfusional, de maneira a se otimizar as relações risco/custo/benefício. Estudos revelam que não existe diferença significativa da oferta de oxigênio (O2) quando se comparam níveis de hemoglobina (Hb) entre 6 e 10 g.dL-1, principalmente pela redução da viscosidade sanguínea, facilitando o fluxo vascular aos tecidos. Existe, no entanto, uma tendência de se recomendar o gatilho da transfusão (GT) sempre que ela atinja valores tão baixos quanto 6-7 g.dL-1. Essa mesma tendência indica que hemácias nunca devem ser administradas com Hb em níveis maiores do que 10 g.dL-1, exceto em situações especiais.

BACKGROUND AND OBJECTIVES: With the surgical and anesthetic technology advance the indications for intervention are expanding, as well as the need for blood transfusions. Because of its great scientific value, the content to be exposed is subject for endless discussions that provide different guidelines in various clinical and laboratory aspects. The objective of this review is to determine the clinical, laboratorial, and monitoring signs that should guide blood transfusion initiation, avoiding any risk and unnecessary use of resources, as well as the delay on starting therapy, determining tissue hypoxia and its corollaries. CONTENT: Scientific articles of clinical trials and reviews were used to range various subjects approached in the present content. These subjects were divided according to clinical and laboratorial aspects. Once the described search finished, 2,608 papers were identified, but only 17 original references were selected by inclusion criteria. CONCLUSIONS: Literature is unclear about clinical criteria on the ideal moment to begin the transfusion therapy in order to optimize the relations risk/ and cost/benefit. Studies show that there is no significant difference of oxygen supply (O2) in a comparison of hemoglobin (Hb) levels between 6 and 10 g.dL-1, mainly by reduced blood viscosity, facilitating the vascular flow to tissues. However, there is a tendency to recommend the transfusion trigger (TT) when it reaches low values as 6-7 g.dL-1. This same tendency indicates that red blood cells should never be administered with Hb levels > 10 g.dL-1, except in special situations.

JUSTIFICATIVA Y OBJETIVOS: Con el avance de la tecnología quirúrgica y anestésica se han extendido las indicaciones de intervención y en muchos casos, la necesidad de transfusión de hemoderivados. Con un gran valor científico, el tema que se expone es objeto de infinitas discusiones que acaban suministrando diferentes directrices en los diversos aspectos clínicos y laboratoriales. El objetivo de esta revisión, es determinar los signos clínicos, laboratoriales y de monitorización que deben guiar el inicio de la hemotransfusión, evitando el riesgo y el uso innecesario de recursos y la demora en el inicio de la terapia, determinando la hipoxia tisular y sus consecuencias. CONTENIDO: Se usaron artículos científicos de ensayos clínicos y revisiones sobre varios asuntos abordados en el texto que se presentará a continuación, dividido en orientaciones según los aspectos clínicos y laboratoriales. Después de la aplicación de la estrategia de búsqueda anteriormente relatada, se identificaron 2.608 artículos científicos del género, pero solamente 17 referencias originales se seleccionaron por los criterios de inclusión. CONCLUSIONES: La literatura no es muy exacta sobre los criterios clínicos que deben guiar el punto ideal de inicio de la terapia transfusional, optimizando las relaciones riesgo/ y coste/beneficio. Los estudios arrojan que no hay diferencia significativa de la oferta de oxígeno (O2) cuando se compara con los niveles de hemoglobina (Hb) entre 6 y 10 g.dL-1, principalmente por la reducción de la viscosidad sanguínea, facilitando el flujo vascular a los tejidos. Existe, sin embargo, una tendencia de recomendar el gatillo de la transfusión (GT) siempre que esa tendencia alcance valores tan bajos como 6 a 7 g.dL-1, y los hematíes nunca deben ser administradas con Hb en niveles mayores que 10 g.dL-1, con excepción de las situaciones especiales.

Análise de variáveis fisiológicas de adolescentes com diagnóstico clínico de asma leve intermitente ou leve persistente quando submetidos a hipóxia aguda e teste de esforço máximo / Analysis of physiological variables during acute hypoxia and maximal stress test in adolescents clinically diagnosed with mild intermittent or mild persistent asthma

OBJETIVO: Analisar variáveis fisiológicas de adolescentes com diagnóstico clínico de asma quando submetidos a teste de hipóxia aguda e de esforço máximo. MÉTODOS: Estudo descritivo transversal composto por 48 adolescentes (12-14 anos), divididos em três grupos: 12 no grupo asma leve intermitente (ALI), 12 no grupo asma leve persistente (ALP) e 24 no grupo controle. Todos foram submetidos a teste de hipóxia aguda e a teste de esforço máximo. Características antropométricas foram coletadas, e variáveis funcionais foram determinadas antes e após o teste de esforço máximo. Em condições de hipóxia aguda, foram registrados o tempo de descida e o tempo de recuperação de SpO2 durante repouso. RESULTADOS: Não foram encontradas diferenças significativas nas variáveis antropométricas nem nas variáveis ventilatórias durante o teste de esforço entre os grupos. Foram encontradas diferenças significativas na pressão de oxigênio com 50 por cento de saturação da hemoglobina antes do teste e na PaO2 antes do teste entre os grupos ALP e controle (p = 0,0279 e p = 0,0116, respectivamente), assim como na tensão de extração de oxigênio antes do teste entre os grupos ALI e ALP (p = 0,0419). Não houve diferenças significativas nos tempos de SpO2 em quaisquer das condições estudadas. O consumo de oxigênio e a eficiência da respiração foram semelhantes entre os grupos. O uso de um broncodilatador não trouxe vantagens nos resultados no teste de hipóxia. Não foram encontradas correlações entre o teste de hipóxia e as variáveis fisiológicas. CONCLUSÕES: Nossos achados sugerem que os adolescentes com asma leve persistente têm uma melhor capacidade de adaptação à hipóxia comparado aos com outros tipos de asma.

OBJECTIVE: To analyze adolescents clinically diagnosed with asthma, in terms of the physiological changes occurring during acute hypoxia and during a maximal stress test. METHODS: This was a descriptive, cross-sectional study involving 48 adolescents (12-14 years of age) who were divided into three groups: mild intermittent asthma (MIA, n = 12); mild persistent asthma (MPA, n = 12); and control (n = 24). All subjects were induced to acute hypoxia and were submitted to maximal stress testing. Anthropometric data were collected, and functional variables were assessed before and after the maximal stress test. During acute hypoxia, the time to a decrease in SpO2 and the time to recovery of SpO2 (at rest) were determined. RESULTS: No significant differences were found among the groups regarding the anthropometric variables or regarding the ventilatory variables during the stress test. Significant differences were found in oxygen half-saturation pressure of hemoglobin prior to the test and in PaO2 prior to the test between the MPA and control groups (p = 0.0279 and p = 0.0116, respectively), as was in the oxygen extraction tension prior to the test between the MIA and MPA groups (p = 0.0419). There were no significant differences in terms of the SpO2 times under any of the conditions studied. Oxygen consumption and respiratory efficiency were similar among the groups. The use of a bronchodilator provided no significant benefit during the hypoxia test. No correlations were found between the hypoxia test results and the physiological variables. CONCLUSIONS: Our findings suggest that adolescents with mild persistent asthma have a greater capacity to adapt to hypoxia than do those with other types of asthma.

Hipóxia e câncer de mama: uma possibilidade futura como terapia-alvo / Hipoxia and breast cancer: a future possibility as traged therapy

Objetivo: Os autores discutem o papel da hipóxia como causa e consequência da carcinogênese mamária e detalham a função de uma proteína, o fator induzível por hipóxia tipo 1 alfa (HIF-1a), como marcador prognóstico e o início de estudos em terapia-alvo com a utilização de inibidores. Métodos: Revisão bibliográfica da literatura. Resultados e Conclusão: A HIF-1a e um importante fator de mau prognóstico tanto em tumores iniciais quanto em localmente avançados e se encontra associado a diversas variáveis, como status axilar e positividade para a proteína Her-2. Contudo, ainda não existem trabalhos suficientes comprovando sua eficácia como fator preditivo.

Objective: The authors discuss the role of hypoxia as cause and consequence of breast carcinogenesis and emphasize a protein's function, hypoxia inducible factor type 1 alpha (HIP-1a), as a prognostic marker and initial studies in target therapy regarding the utilization of HIP-1a inhibitors. Methods: Bibliographic review of the literature. Results and Conclusion: HIP-1a is an important worse prognostic factor in initial and locally advanced tumors and that it is associated with diverse variables, such as axillary status and Her-2 positivity. However, there are fewer researches analyzing its efficacy as a predictive factor.

Avaliação dos níveis séricos de testosterona em pacientes com síndrome da apneia obstrutiva do sono / Evaluation of testosterone serum levels in patients with obstructive sleep apnea syndrome

Homens com síndrome da apneia obstrutiva do sono (SAOS) podem apresentar diminuição dos níveis de testosterona devido à hipóxia. OBJETIVOS: Relacionar os níveis séricos da testosterona, em pacientes com SAOS, com parâmetros clínico-laboratoriais. MATERIAL E MÉTODOS: Foram revisados 103 prontuários de pacientes com SAOS, entre os anos de 2002 e 2009, e coletados os seguintes dados: idade à época da realização da polissonografia, valores do Hematócrito e Hemoglobina, nível sérico da testosterona total, IMC, índice de apneia/hipopneia(IAH) e SatO2. FORMA DO ESTUDO: Estudo de casos retrospectivo em corte transversal. RESULTADOS: 79 pacientes (77 por cento) não apresentaram alteração hormonal e 24 (23 por cento) apresentaram níveis séricos inferiores. Dos pacientes com testosterona normal 70 por cento estavam com sobrepeso, enquanto que 63 por cento com testosterona alterada apresentaram obesidade grau I (p<0,05). Os pacientes com testosterona alterada apresentaram as dosagens médias do Ht e da Hb e dos níveis médios do andrógeno significantemente inferiores aos dos pacientes sem alteração androgênica. A média do IMC dos pacientes com alteração hormonal foi significativamente maior que a média daqueles sem alteração. CONCLUSÃO: A relação entre o perfil sérico da testosterona matinal e a obesidade e, em menor grau, a idade, o IAH e a hipóxia, podem ser responsáveis pela supressão central da testosterona nesses pacientes. A queda dos valores hematimétricos pode ser relacionada aos baixos níveis circulantes da testosterona.

Males with obstructive sleep apnea syndrome (OSAS) may present decreased testosterone serum levels because of hypoxemia. AIM: To correlate testosterone levels in OSAS patients with laboratory parameters. MATERIAL AND METHODS: 103 registries of OSAS patients were reviewed from 2002 to 2009. The following data collected: age when polysomnography was done, hematocrit and hemoglobin levels, total testosterone serum levels, BMI, apnea/hypopnea index (AHI), and O2 saturation. STUDY DESIGN: A cross-sectional retrospective case study. RESULTS: 79 patients (77 percent) had no hormonal changes, and 24 patients (23 percent) had decreased serum levels. In patients with normal testosterone levels, 70 percent were overweight; 63 percent with altered testosterone levels had obesity grade I (p<0.05). Patients with altered testosterone levels had significantly lower average doses of Ht, Hb and androgen compared to patients without altered androgen levels. The average BMI of patients with altered hormone levels was significantly higher compared to patients with normal hormone levels. CONCLUSIONS: The relationship between morning testosterone levels and obesity, and to a lesser degree age, AHI and hypoxemia may be the cause of central suppression of testosterone in these patients. Decreased blood HT and HB levels may be related to lower levels of circulating testosterone.

Study of rat hepatocytes in primary culture submitted to hypoxia and reoxygenation: action of the cytoprotectors prostaglandin E1, superoxide dismutase, allopurinol and verapamil / Estudo de hepatócitos de rato em cultura primária submetidos a hipóxia e reoxigenação: ação dos citoprotetores prostaglandina E1, superóxido dismutase, alopurinol e verapamil

Context: Exposure of hepatocytes to pathological conditions in a microenvironment of hypoxia and reoxygenation is very frequent in hepatic diseases. Several substances present perspectives for cytoprotective action on hepatocyte submitted to reoxygenation after hypoxia and simple hypoxia. Objective: We research therapeutic options for hepatocytes submitted to hypoxia and hypoxia + reoxygenation injury. Methods: Primary culture of rat hepatocytes was submitted to hypoxia (2 hours) plus reoxygenation (2 hours) and simple hypoxia (4 hours) in the presence or the absence of cytoprotectors. The hepatocyte lesion was evaluated by functional criteria through percentage of lactate dehydrogenase released and cell viability. The effects of the cytoprotectors prostaglandin E1 3 ηg/mL, superoxide dismutase 80 μg/mL, allopurinol 20 μM and verapamil 10-4 M were studied in this model of injury. Results: Reoxygenation after hypoxia induced more significant lesion in cultured hepatocytes compared to simple hypoxia, detected by analysis of functional criteria. There was a significant reduction of percentage of lactate dehydrogenase released and a significant increase of percentage of cell viability in the hypoxia + reoxygenation + cytoprotectors groups compared to hypoxia + reoxygenation groups. Prostaglandin E1, superoxide dismutase and verapamil also protected the group submitted to simple hypoxia, when evaluated by functional criteria. Conclusions: We conclude that reoxygenation after hypoxia significantly increased the lesion of cultured rat hepatocytes when compared to simple hypoxia. Prostaglandin E1, superoxide dismutase, allopurinol and verapamil acted as cytoprotectors to the rat cultured hepatocytes submitted to hypoxia + reoxygenation in vitro. The substances prostaglandin E1, superoxide dismutase and verapamil protected hepatocytes submitted to simple hypoxia on the basis of all the criteria studied in this experimental model.

Contexto: A exposição dos hepatócitos a condições patológicas em que ocorram microambientes de hipóxia e reoxigenação são muito frequentes em doenças hepáticas. Várias substâncias apresentam perspectivas de ação citoprotetora para hepatócitos submetidos a reoxigenação após hipóxia e hipóxia simples. Objetivo: Pesquisaram-se opções terapêuticas para o dano dos hepatócitos submetidos a hipóxia e hipóxia + reoxigenação. Métodos: Hepatócitos de rato em cultura primária foram submetidos a hipóxia (2 horas) mais reoxigenação (2 horas) e hipóxia simples (4 horas), na presença ou ausência dos citoprotetores. A lesão dos hepatócitos foi avaliada por critérios funcionais através da percentagem liberada de desidrogenase láctica e da viabilidade celular. Os efeitos dos citoprotetores prostaglandina E1 3 ηg/mL, superóxido dismutase 80 μg/mL, alopurinol 20 μM e verapamil 10-4M, foram estudados neste modelo de injúria celular. Resultados: A reoxigenação após hipóxia induziu lesão mais significativa nos hepatócitos cultivados comparado com hipóxia simples, conforme demonstrado pela análise dos critérios funcionais. Houve significativa redução da porcentagem liberada de desidrogenase láctica e aumento significativo da percentagem de viabilidade celular nos grupos hipóxia + reoxigenação + citoprotetores em comparação com o grupo hipóxia + reoxigenação. Prostaglandina E1, superóxido dismutase e verapamil também protegeram o grupo hipóxia simples, quando avaliado pelos critérios funcionais. Conclusões: Conclui-se que a reoxigenação após hipóxia aumentou significativamente a lesão dos hepatócitos de rato cultivados, em comparação com a hipóxia simples. Prostaglandina E1, superóxido dismutase, alopurinol e verapamil foram citoprotetores para os hepatócitos de rato submetidos a hipóxia + reoxigenação in vitro. As substâncias prostaglandina E1, superóxido dismutase e verapamil protegeram os hepatócitos submetidos a hipóxia simples com base em...

Modulação da viabilidade de fibroblastos cardíacos em cultura frente a hipóxia: papel de diferentes concentrações de glicose / Modulation of the viability of cardiac fibroblasts in culture against hypoxia: role of different concentrations of glucose

Estudos mostram que a exposição ao meio hiperglicêmico ou diabetes protege o coração contra insultos patológicos, incluindo isquemia. A ativação de fatores anti-apoptóticos e proliferativos parece estar envolvida com esta cardioproteção. Este estudo foi desenhado para investigar a modulação da viabilidade de fibroblastos cardíacos submetidos à hipóxia tratados previamente com meio hiperglicêmico, e os efeitos de 15 dias de infarto do miocárdio (IM) na função ventricular em ratos diabéticos sobre os fatores de morte e sobrevida celular. Foram utilizados ratos Wistar machos e as análises foram realizadas no ventrículo esquerdo. Para as análises in vitro, os fibroblastos cardíacos foram obtidos por digestão enzimática (tripsina/colagenase), e cultivados em dois meios: baixa Glicose (5mM) e alta Glicose (25mM análogo ao plasma diabético). As células confluentes (80%) foram submetidas à hipóxia por incubadora modular com gás (5,6% de CO2 e 94,4% de N2); após as células foram mantidas em estufa a 37ºC por 6; 12; 24; 48 e 72hs. Experimentos de citometria de fluxo foram realizados para análise da viabilidade celular e fragmentação de DNA, ambas para verificação de apoptose e confirmadas pelas medidas de AnexinaV/FITC/IP. A expressão do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) foi medida no sobrenadante dos meios por ELISA. Para as análises in vivo, os ratos foram divididos (N=8/grupo) em grupos: controle (C), diabético (D), infartado (I) e diabético infartado (DI). Quinze dias após a indução do diabetes ou não, com injeção de estroptozotocina (50mg/Kg) ou tampão citrato, os grupos I e DI foram submetidos à ligadura da artéria coronária. Após 15 dias de IM e/ou 30 de diabetes, a função cardíaca (sistólica e diastólica) foi analisada por ecocardiograma, além da avaliação do tamanho do IM em 24 horas e 15 dias. As citocinas inflamatórias foram medidas por ELISA, a expressão gênica dos fatores de morte e sobrevida celular foram avaliados por PCR...

Studies showed that exposure to hyperglycemia or diabetes protects the heart against pathological insults, including ischemia. The activation of anti-apoptotic factors and proliferation seem to be involved in this cardioprotection. This study was designed to investigate the feasibility of modulation of hyperglycemic-environment pretreated-cardiac fibroblasts subjected to hypoxia, and the effects of 15 days of myocardial infarction on ventricular function in diabetic rats and on the causes of death and cell survival. Male Wistar rats were used and the analyses were performed in the left ventricle. For in vitro experiments, cardiac fibroblasts were obtained by enzymatic digestion (trypsin/collagenase) and they were cultivated in two different mediums: Low Glucose (5mM) and High Glucose (25mM similar to diabetic plasma). Confluent cells (80%) were subjected to hypoxia by modular incubator with gas (5.6% CO2 and 94.4% N2) at 37 ° C for 6, 12, 24, 48 and 72h. Flow cytometry was employed to the analysis of cell viability and DNA fragmentation, both for verification of apoptosis process and confirmed by AnexinaV / FITC / IP. The expression of vascular growth factor (VEGF) was measured in the supernatant medium by ELISA. For in vivo experiments, the rats were divided (N = 8/group) in control (C), diabetic (D), infarcted (I) and diabetic infarcted (DI) groups. After 15 days of induction of diabetes by estreptozotocin (50mg/kg) or citrate buffer, the I and DI groups underwent coronary artery ligation. After 15 days of myocardium infarction (MI) and/or 30 of diabetes, cardiac function (systolic and diastolic) was analyzed by echocardiogram, as well as the size of infarction at both, 24 hours and 15 days. The inflammatory cytokines were measured by ELISA, the gene expression of factors for death and cell survival by real-time PCR, the activity of caspase 3 by spectrofluorimetry, the protein expression of glucose transporters (GLUT)...